丹参多酚酸盐注射液在肝病治疗中的应用

丹参多酚酸盐注射液是治疗心脑血管疾病的常用药,临床应用及实验研究过程中发现该药对急、慢性肝脏疾病具有一定的治疗作用。就近年来丹参多酚酸盐注射液在临床肝病治疗中的应用以及实验研究中所取得的进展的文献做一综述。     

栀子苷对大鼠肝损伤及血清、肝脏、粪便中胆汁酸的影响

目的 探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性,以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法 60只SD大鼠,雌雄各半,按体质量随机分成空白组及栀子苷（50,100,200,400 mg·kg^-1）组,共5组,每组12只,每天灌胃给药1次,连续7 d,于第8天收集大鼠血清、肝组织和盲肠内容物。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,门冬氨酸氨基转移酶（AST）,碱性磷酸酶（ALP）活性,白蛋白（ALB）,总胆红素（TBIL）,总胆汁酸（TBA）,肌酐（Crea）,尿素（Urea）含量,肝脏组织切片分别作苏木素-伊红（HE）染色,免疫组化检测细胞角蛋白7（CK7）,细胞角蛋白19（CK19）蛋白表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肝组织CK7,CK19蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）,胆固醇27α-羟化酶（CYP27A1）,胆固醇12α-羟化酶（CYP8B1） mRNA表达情况,采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS）测定血清、肝脏及盲肠内容物中18种胆汁酸含量。结果 与空白组比较,各剂量栀子苷组TBIL水平显著升高（P<0.01）;400 mg·kg^-1栀子苷组ALT,AST活性和TBA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）;HE染色表明,与空白组比较,栀子苷200,400 mg·kg^-1组肝组织的汇管区有胆管反应,胆管周围有炎症细胞的浸润,尤以栀子苷400 mg·kg^-1毒性明显。栀子苷400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中CK7,CK19表达较空白组明显增加（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA）,甘氨猪去氧胆酸（GHDCA）含量明显下降（P<0.05,P<0.01）,牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）,猪去氧胆酸（HDCA）,胆酸（CA）,鹅去氧胆酸（CDCA）含量显著升高（P<0.01）,甘氨胆酸（GCA）,甘氨鹅去氧胆酸（GCDCA）,甘氨脱氧胆酸（GDCA）,甘氨石胆酸（GLCA）,牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）,GUDCA,GHDCA,熊去氧胆酸（UDCA）,牛磺石胆酸（TLCA）的含量占比降低,TCDCA,HDCA,CA,CDCA,脱氧胆酸（DCA）的占比增加;血清中GHDCA,石胆酸（LCA）含量显著下降（P<0.01）,牛磺猪去氧胆酸（THDCA）,牛磺胆酸（TCA）,GCA,TCDCA,UDCA,CA,CDCA,DCA含量明显增加（P<0.05,P<0.01）,CA/DCA显著升高（P<0.01）,且CA与CDCA含量占比分别上升19.60%和4.63%;与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组盲肠内容物中所有的胆汁酸含量均下降,其中GCA,UDCA,HDCA,GCDCA,GDCA,TLCA,GLCA,CDCA,DCA,LCA含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中CYP7A1,CYP27A1 mRNA表达明显增加（P<0.05,P<0.01）。结论 400 mg·kg^-1栀子苷灌胃,可导致大鼠明显的肝损伤,其肝脏、血清与粪便中胆汁酸发生显著改变,且同一种胆汁酸在肝脏、血清与粪便中的变化不尽相同。然而,由栀子苷所导致的肝损伤与体内胆汁酸变化间的因果关系尚不清楚,仍有待后续进一步研究给予阐明。     

年龄与性别对异硫氰酸萘酯中毒小鼠急性肝损伤的影响

目的：研究年龄与性别对异硫氰酸萘酯（ANIT）中毒所致小鼠急性肝损伤的影响。方法：采用一次性ANIT 75mg/Kg经口灌胃染毒致5、10、20周龄雌雄性小鼠急性肝损伤,通过肝功能（ALT,AST、DBil）检测和肝组织HE染色病理学检查,观察不同性别和年龄小鼠急性肝损伤变化特征。结果：ANIT 75mg/Kg经口灌胃染毒可致5周龄小鼠血清ALT、AST和DBil明显上升,肝组织学呈明显淤胆改变。随着年龄增加,ANIT中毒所致小鼠上述改变更加明显。雄性小鼠明显重于雌性小鼠,雌性小鼠怀孕后肝损伤胆红素上升,ANIT 100mg/Kg经口灌胃可致雄性老年小鼠出现死亡。结论：ANIT中毒所致小鼠急性肝损伤与年龄和性别密切相关,毒性以雄性老年小鼠更加明显,只适合用于制作原发性硬化性胆管炎（PSC）动物模型。     

疏肝化痰降脂方减轻非酒精性脂肪性肝病小鼠炎症损伤的作用及机制研究

目的 观察疏肝化痰降脂方对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠炎症损伤的作用及机制，以期为疏肝化痰降脂方的临床应用提供实验依据。方法 50只C57BL/6雄性小鼠被随机分为5组：正常对照组（质量分数为0.9%的氯化钠溶液）、模型组（质量分数为0.9%的氯化钠溶液）、疏肝化痰降脂方低剂量组（8.32 g/kg）、疏肝化痰降脂方组中剂量组（16.65 g/kg）和疏肝化痰降脂方高剂量组（33.29 g/kg），每组10只。采用高脂饲料喂养方式构建NAFLD小鼠动物模型，于给药后12周末处死。观察小鼠肝脏组织病理学形态变化；检测小鼠血清中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平；检测小鼠肝脏组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB p65(NF-κB p65)的蛋白与mRNA表达水平。结果 与正常对照组比较，模型组小鼠肝组织炎症损伤严重，疏肝化痰降脂方各剂量组干预后，小鼠肝脏组织损伤程度明显减轻，炎性病灶显著减少。与正常对照组比较，模型组小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平及肝脏...     

丹参酚酸B盐对转化生长因子β1活化的大鼠肝星状细胞内细胞外信号调节激酶信号转导通路的抑制作用

目的：探讨丹参酚酸B盐（salvianolicacidB,SA—B）对转化生长因子βl（transforminggrowthfactor-β1,TGF—β1）活化的大鼠肝星状细胞（hepaticstellatecell,HSC）内细胞外信号调节激酶（extracellularsignal—regulatedkinase,ERK）信号转导通路的影响。方法：采用原位灌流酶消化及Nycodenz密度梯度离心的方法分离正常大鼠HSC,将TGF—β1和SA—B直接添加于原代HSC的无血清培养液中。蛋白印记法检测HSC内磷酸化和总ERK,以及有丝分裂原激活蛋白激酶激酶MEK、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶Raf、α平滑肌肌动蛋白（α—smoothmuscleactin,α—SMA）和工型胶原蛋白的表达。结果：SA—B可抑制正常原代HSC及TGFp1刺激的HSC内ERK上游激酶MEK的磷酸化;而对正常原代HSC及TGF—β1刺激的HSC内MEK上游激酶Raf-1的磷酸化无明显抑制。SA—B对TGF-β1刺激的HSC内α—SMA表达有明显的抑制作用,SA—B与ERK阻断剂联用,几乎接近完全阻断α-SMA的表达。SA—B对正常培养的HSC和经TGF—β1刺激的HSCI型胶原蛋白的合成都有明显的抑制作用。结论：SA—B抑制TGF—β1刺激的HSC内ERK信号转导通路的作用环节在于抑制了MEK的磷酸化。SA—B通过抑制TGF-β1的ERK信号转导通路,减少了因HSC活化导致的α—SMA表达和工型胶原蛋白合成增加。     

扶正化瘀方影响转化生长因子β1/Smad信号通路的抗肝纤维化作用机制

目的：探讨扶正化瘀方影响转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）/Smad信号转导的抗肝纤维化作用机制。方法：本研究分体内实验和体外实验两部分。在体内实验中,37只雄性Wistar大鼠分为正常组（5只）、模型组（18只）和扶正化瘀方组（14只）。模型组和扶正化瘀组大鼠采用二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine,DMN）腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型。灌胃治疗4周后,采用盐酸水解法检测肝组织中羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量,蛋白质印迹法分析肝组织中TGF-β1、TGF-β1Ⅰ型受体（TGF-β1 type Ⅰ receptor,TβR-Ⅰ）、Smad2、Smad3及磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外实验采用培养4d的原代大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）,分为对照组、TGF-β1组、10%扶正化瘀方药物血清组及TβR-Ⅰ胞内激酶抑制剂（SB-431542）组。后3组用2.5ng/mLTGF-β1刺激24h后,对照组及TGF-β1组加10%正常大鼠血清,10%扶正化瘀方药物血清组加10%服用扶正化瘀方的大鼠血清,SB-431542组加10%正常大鼠血清及10μmol/LSB-431542。共孵育24h后,免疫荧光染色检测HSC中α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和Smad3蛋白的表达,蛋白质印迹法分析HSC中α-SMA蛋白的表达。结果：体内实验发现,扶正化瘀方可明显降低纤维化肝组织中异常升高的Hyp含量及TGF-β1、TβR-Ⅰ、磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外研究发现,正常HSC中α-SMA、TβR-Ⅰ表达较低,TGF-β1刺激可显著上调其表达;扶正化瘀方药物血清共孵育后,可明显抑制TGF-β1诱导的HSC中α-SMA的表达;正常HSCSmad3主要表达在细胞质中,细胞核中表达较低,TGF-β1可显著刺激Smad3向细胞核转移,扶正化瘀方药物血清可明显抑制TGF-β1诱导的Smad3核转位。结论：扶正化瘀方可下调纤维化大鼠肝脏及HSC中的TGF-β1/Smad病理信号转导通路,这可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的部分作用机制。     

143例肝硬化死亡患者的感染特征及中医证型特点分析

目的:探究肝硬化死亡患者的感染特征及中医证型特点。方法:回顾性分析2017年1月-2021年12月上海中医药大学附属曙光医院肝病科143例肝硬化伴或不伴感染的死亡患者的病例资料，包括肝硬化病因、中医证型、实验室指标、并发症、感染部位及感染病原体等，并计算Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分、终末期肝病血清钠模型(MELD-Na)评分。计量资料两组间比较采用独立样本t检验或Mann-Whitney U秩和检验，计数资料组间比较采用χ²检验或Fisher精确概率法。结果:143例患者肝硬化病因以乙型病毒性肝炎为主，酒精性肝病、自身免疫性肝病、血吸虫感染位列其后。肝硬化相关并发症发生率：腹腔积液(85.31%)、原发性肝癌(57.34%)、慢加急性肝衰竭(54.55%)、急性肾损伤(50.35%)、胸腔积液(45.45%)、肝性脑病(42.66%)、门静脉血栓(39.16%)、门脉高压相关消化道出血(32.87%)等。直接死亡原因为多脏器功能衰竭、循环衰竭、中枢性呼吸循环衰竭及呼吸衰竭。感染发生率为72.73%,感染部位包括肺部、腹腔、尿路、皮肤/软组织...     

湿热内蕴证、肝郁脾虚证非酒精性脂肪性肝病患者眼底图像特征分析

目的 运用机器学习方法分析非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）常见中医证型（湿热内蕴证、肝郁脾虚证）患者的眼底血管图像变化特征，以期为中医目诊及肝病证候分类提供客观依据。方法 借助眼底照相机采集NAFLD患者、健康人群的眼底血管图像，同时收集性别、年龄等一般资料，以及临床症状信息，通过改进的U-Net模型分割眼底血管，采用计算机视觉技术提取血管颜色、形态及Haralick纹理特征，并以健康人群为对照运用决策树模型建立疾病预测模型。运用SPSS 26.0及R语言分析湿热内蕴、肝郁脾虚型NAFLD患者的眼底图像特征，以及眼底图像特征与一般资料、临床症状等影响因素间的相关性。结果 (1)共纳入NAFLD患者126例，其中湿热内蕴证61例、肝郁脾虚证44例、无典型证21例，分别设为湿热内蕴组、肝郁脾虚组、无典型证组；纳入健康人110例，设为健康组。(2)基于决策树模型建立NAFLD疾病诊断模型，准确率为0.972，灵敏度为0.970，特异性为0.975,AUC为0.995，可有效用于对NAFLD患者眼底血管特征的分析。(3)在血管形态和颜色特征方面，与无典型证组比较，湿热内蕴及肝郁脾虚组血管总面积...     

扶正化瘀组分复方抑制血管新生的抗肝纤维化作用机制

目的:本研究旨在探讨扶正化瘀组分复方的抗肝纤维化作用及其作用机制。方法:采用DMN诱导小鼠肝纤维化模型,以扶正化瘀方为阳性对照。以天狼猩红染色和羟脯氨酸含量评估肝纤维化程度;肝脏微血管成像和CD31标记微血管密度评价肝脏血管新生;western blot法检测肝组织VEGF-R2表达;通过计数转基因斑马鱼功能性节间血管数和碱性磷酸酶活性验证药物对血管的影响。结果:扶正化瘀组分复方可显著改善纤维化小鼠血清肝功能(P<0.01):减少肝组织胶原沉积(P<0.01);减少肝脏微血管数量(P<0.01);下调VEGFR2蛋白表达(P<0.01);抑制斑马鱼碱性磷酸酶活性。结论:扶正化瘀组分复方具有抑制DMN诱导小鼠肝纤维化模型肝组织纤维化的作用,其作用机制可能与抑制血管新生有关。     

健脾清化方对CKD2～3期患者慢性微炎症状态的随机对照多中心研究

目的:研究健脾清化方对慢性肾脏疾病(CKD)2～3期脾虚湿热患者慢性微炎症状态的作用。方法:3个中心的随机对照临床研究,随机分成中药组和对照组,并设20例健康体检患者为正常组。对照组予西医常规治疗,中药组在对照组基础上加用健脾清化方。共随访8周,观察治疗前后血肌酐(Scr)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)的变化。结果:最终中药组有74例、对照组有73例完成研究。治疗前两组的hs-CRP、IL-17、IFN-γ比正常组显著升高(P<0.05)。8周的治疗后,中药组的Scr有显著下降(P<0.05)。中药组hs-CRP平均下降了26.4%(P<0.05),而对照组有上升的趋势。中药组IL-17平均下降了73.5%(P<0.05),对照组平均下降了25.6%。中药组IFN-γ平均下降了48.3%(P<0.05),而对照组平均下降了23.3%。结论:CKD2～3期的脾虚湿热患者存在慢性微炎症状态,健脾清化方能明显改善微炎症状态。